关于现代病原生物学教学改革的探讨

病原生物学是必不可少的医学基础学科。为适应现代医学发展趋式,病原生物学的教学改革势在必行。本文结合本院实际,通过对病原生物学教学中所存在问题的分析,论述近年来所采取的相应教学改革措施及其所取得的成果。     

雷帕霉素药物涂层支架治疗分叉病变不同方法的对比

目的：比较主支内或主支与分支内同时置入雷帕霉素药物涂层支架(CYPHERTM，cordis)治疗冠状动脉分叉病变的临床疗效。方法：主要冠状动脉分叉病变31例，20例采用对吻球囊技术对主支和分支预扩张．仅主支内置入CYPHERTM支架。B组11例采用“T型”支架技术，分别在主支和分支置入CYPHERTM支架。临床随访3～6个月．观察主要不良心脏事件的发生。结果：两组患之间基础临床情况及冠脉造影血管特征差异无显性。A组主支成功率为100％，分支成功率90％(18／20)。B组支架成功率为100％。两组均无主要不良心脏事件发生。结论：主支或主支与分支内同时置入CYPHERTM支架治疗冠状动脉分叉病变同样安全有效。     

舌运动疗法预防化疗患者口腔炎的临床研究

目的探讨化疗患者舌运动疗法预防和减少121腔炎的效果。方法将50例接受化疗的患者随机分为实验组和对照组各25例，在化疗开始前对2组患者行常规口腔护理宣教，保持口腔清洁湿润，防止口腔黏膜外伤；在此基础上，对实验组患者指导其在化疗前、中、后行舌运动疗法，每次待唾液充满口腔后咽下，10～20次/d。比较2组患者口腔炎的发生率。结果化疗后实验组发生口腔炎3例占12％，对照组发生口腔炎12例占48％，2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论舌运动疗法能有效的预防和减少化疗患者口腔炎的发生，值得在临床中推广应用。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型研究

目的：研究医院感染超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的基因型。方法：收集分离鉴定菌株，通过K—B法药敏实验初筛以确认产ESBLs菌株，并对ESBLs基因进行初步分型。结果：17株肺炎克雷伯菌产生的ESBLs以CTX-M-3、CTX-M-15、CTX-M-22为主要基因型，其中8株为CTX—M-3型；6株为CTX-M-22型；1株为CTX-M-15型；1株同时产CTX-M-3、CTX-M-22；1株同时产CTX-M-15、CTX-M-22型。结论：我院肺炎克雷伯菌临床分离株中的ESBLs基因型以CTX-M型酶为主。     

基于一测多评法对注射用益气复脉(冻干)中9种成分的质量控制研究

目的建立用于测定注射用益气复脉(冻干)(YFI)中9种成分人参皂苷Rb_1(Rb_1)、Rg_1(Rg_1)、Re(Re)、Rf(Rf)、Rc(Rc)、Ro(Ro)、Rb_2(Rb_2)、Rd(Rd)及五味子醇甲(Sch)的一测多评(QAMS)方法,探讨QAMS法用于不同类型化学成分定量测定的准确性与可行性。方法采用高效液相色谱法,Diamonsil~?C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,体积流量为1 m L/min,检测波长203 nm。建立Rg_1、Re、Rf、Rc、Ro、Rb_2、Rd及Sch与内参物Rb_1的相对校正因子(f),通过f计算YFI中8种成分的量,并在25批YFI中进行验证,将该方法与外标法测定的结果进行对比分析,以验证QAMS法的合理性、可行性和可重复性。结果 Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rc、Ro、Rb_2、Rd、Sch分别在进样量为0.929~4.644、0.818~4.089、0.732~3.660、1.461~7.305、0.636~3.181、0.618~3.092、0.788~3.941、0.758~3.789、0.178~0.889μg线性关系良好,加样回收率为97.08%~100.94%;f值分别为f_(Rg_1/Rb_1)=1.970,f_(Re/Rb_1)=0.929,f_(Rf/Rb_1)=1.196,f_(Rc/Rb_1)=0.870,f_(Ro/Rb_1)=0.830,f_(Rb_2/Rb_1)=0.786,f_(Rd/Rb_1)=0.906,f_(Sch/Rb_1)=12.082,且在不同条件下重复性良好;QAMS法的计算结果与外标法的实测值之间无显著性差异,实验所得的f值可信。结论本实验建立的QAMS法可以作为一种简便准确的质量评价模式用于YFI中多种人参皂苷类成分和Sch的质量控制。     

青叶胆化学成分的UPLC-ESI-Q-TOF-MS分析

目的运用超高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对中药青叶胆Swertia mileensis的主要化学成分进行定性分析。方法采用ACQUITY HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),用0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.4 m L/min,质谱使用ESI离子源,正负离子模式下采集数据,运用Masslynx4.1软件并结合Sci Finder数据库、獐牙菜属相关文献以及对照品信息进行数据分析。结果从青叶胆中鉴定出化学成分28个,包括7个环烯醚萜类、14个酮类、3个黄酮类、2个三萜类以及2个酚类。其中断马钱子苷半缩醛内酯、8-O-β-D-吡喃木糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖-1,7-二羟基-3-甲氧基酮、3-氧去甲双酮苷和sweriyunnanlactone A为首次从该植物中发现。结论 UPLC-ESI-Q-TOF-MS技术能够快速准确地鉴定青叶胆中的化学成分,为其质量控制和药效物质基础研究提供一种新的研究策略。     

克罗米芬联合醋酸环丙孕酮对多囊卵巢综合征患者血清性激素水平和25羟维生素D及排卵状况的影响

目的探讨克罗米芬联合醋酸环丙孕酮对多囊卵巢综合征患者血清性激素水平、25羟维生素D及排卵状况的影响。方法选取2018年9月至2020年6月本院收治的多囊卵巢综合征患者58例作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组29例。对照组采用醋酸环丙孕酮治疗,观察组采用克罗米芬联合醋酸环丙孕酮治疗,比较两组治疗前后血清激素水平、25羟维生素D、超敏C反应蛋白和BMI变化及治疗后妊娠率和排卵率。结果治疗后,观察组促黄体生成素、睾酮和促黄体生成素/促卵泡生成素水平均低于对照组(P<0.05),两组促卵泡生成素比较差异无统计学意义;治疗后,观察组25羟维生素D高于对照组,超敏C反应蛋白低于对照组(P<0.05),两组BMI比较差异无统计学意义;治疗后,观察组妊娠率高于对照组(P<0.05),两组排卵率比较差异无统计学意义。结论克罗米芬联合醋酸环丙孕酮治疗多囊卵巢综合征效果显著,可以降低血清性激素,提高妊娠率。     

注射用丹参多酚酸对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用

目的 考察注射用丹参多酚酸（SAFI）对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用。方法 线拴法构建大脑中动脉缺血再灌注（MCAO/R）大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、丁苯酞氯化钠注射液（阳性药,9 mL·kg^-1）组和SAFI低、中、高剂量（5.85、11.71、23.42 mg·kg^-1,11.71 mg·kg^-1为临床等效剂量）组,每组12只。假手术组和模型组给予0.9%氯化钠注射液,SAFI每天给药1次,丁苯酞氯化钠注射液每天给药2次,尾iv连续给药14 d。给药期间称大鼠体质量;给药前后对各组大鼠进行神经功能评分;给药后采用TTC染色法检测脑梗死体积;酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和超氧化物歧化酶（SOD）的水平;HE染色观察脑组织病理形态;尼氏染色观察海马区尼氏小体形态变化情况。结果 给药14 d后,与模型组比较,SAFI 5.85、11.71、23.42 mg · kg^-1组和丁苯酞氯化钠注射液组大鼠体质量显著增加（P ＜ 0.001）,脑组织梗死体积显著缩小（P＜0.001） ;SAFI 11.71、23.42 mg·kg^-1组和丁苯酞氯化钠注射液组神经功能评分显著降低（P＜0.05、0.01）,IFN-γ、IL-1β和TNF-α水平均显著降低（P＜0.01、0.001）,SOD水平显著升高（P＜0.01、0.001）; SAFI 23.42 mg·kg^-1组和丁苯酞氯化钠注射液组IL-6水平显著降低（P＜0.05、0.01）; SAFI可明显改善MCAO/R大鼠脑组织缺血半暗带区病理损伤,抑制尼氏小体数的减少。结论 SAFI对脑缺血再灌注大鼠脑损伤具有明显的保护作用。     

HPMEC-ELSD法检测注射用丹参多酚酸中大分子物质

目的 建立注射用丹参多酚酸（SAFI）中大分子物质（相对分子质量≥1.0×10⁴）的高效分子排阻色谱-蒸发光散射（HPMEC-ELSD）检测方法。方法 采用超滤离心方法（截留相对分子质量为3 000,转速为4 000 r·min^-1）对供试品溶液中的大分子物质进行分离富集。色谱条件为：检测器ELSD,Ultrahydrogel 500与Ultrahydrogel 250色谱柱串联,流动相0.02%甲酸水溶液,流动相体积流量0.6 mL·min^-1,柱温35℃,进样量10 μL,压缩空气体积流量2.5 L·min^-1,漂移管温度105℃,不分离模式,增益1。结果 该方法空白无干扰,专属性良好;精密度、重复性、加样回收率均良好;右旋糖酐在相对分子质量2 700～36 800线性良好,回归方程为Y＝－0.220 5 X＋10.247 0（R²＝0.994 5）;对照品溶液和供试品溶液50 h稳定性良好;不同流动相、流动相体积流量、柱温、压缩空气体积流量、漂移管温度等的耐用性良好。17批SAFI均未检出大分子物质。结论 建立的HPMEC-ELSD方法简便、快捷,可用于SAFI中大分子物质的检测。